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ELISA試劑盒實驗人員培訓
發(fā)布時間： 2014-06-13 點擊次數(shù)： 1288次在ELISA試劑盒實驗中，進行各項實驗條件的選擇是很重要的，其中包括：
固相載體的選擇：許多物質可作為固相載體，如聚氯乙烯、聚苯乙烯、聚丙酰胺和纖維素等。其形式可以是凹孔平板、試管、珠粒等。當前常用的是40孔聚苯乙烯凹孔板。不管何種載體，在使用前均可進行篩選：用等量抗原包被，在同一實驗條件下進行反應，觀察其顯色反應是否均一性，據(jù)此判明其吸附性能是否良好。
包被抗體（或抗原）的選擇：將抗體（或抗原）吸附在固相載體表面時，要求純度要好，吸附時一般要求PH在9.0～9.6之間。吸附溫度，時間及其蛋白量也有一定影響，一般多采用4℃18～24小時。蛋白質包被的zui適濃度需進行滴定：即用不同的蛋白質濃度（0.1、1.0和10μg/ml等）進行包被后，在其它試驗條件相同時，觀察陽性標本的OD值。選擇OD值zui大而蛋白量zui少的濃度。對于多數(shù)蛋白質來說通常為1～10μg/ml。
酶標記抗體工作濃度的選擇：首先用直接ELISA法進行初步效價的滴定（見酶標記抗體部份）。然后再固定其它條件或采取“方陣法”（包被物、待檢樣品的參考品及酶標記抗體分別為不同的稀釋度）在正式實驗系統(tǒng)里準確地滴定其工作濃度。
酶的底物及供氫體的選擇：對供氫體的選擇要求是價廉、安全、有明顯地顯色反應，而本身無色。有些供氫體（如OPD等）有潛在的致癌作用，應注意防護。有條件者應使用不致癌、靈敏度高的供氫體，如TMB和ABTS是當前較為滿意的供氫體。底物作用一段時間后，應加入強酸或強堿以終止反應。通常底物作用時間，以10-30分鐘為宜。底物使用液必須新鮮配制，尤其是H2O2在臨用前加入。
目前，國內也有很多酶聯(lián)免疫（ELISA）代測服務機構。
●ELISA試劑盒檢驗人員需經(jīng)過培訓，熟練掌握本專業(yè)如下幾方面的技術知識：
◎檢驗項目的基本原理 ELISA試劑盒（ELISA試劑盒原理）;
◎臨床意義;
◎熟悉檢測技巧，了解易出差錯的環(huán)節(jié)及難點;
◎熟悉檢測試劑性能（包括試劑盒組成，包被片段及其組成）;
◎ 熟悉檢測儀器的原理及性能;掌握數(shù)據(jù)處理的能力和質量控制知識。
◎某些特殊項目的檢測如抗HIV等需經(jīng)有關部門組織的專門培訓班，考試合格后持證上崗。- 上一篇：新一代ELISA試劑盒存儲規(guī)定
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