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中科院動物研究所分離出小鼠皮膚干細(xì)胞
發(fā)布時間： 2009-08-07 點擊次數(shù)： 3537次來自中科院動物研究所的段恩奎等人從小鼠分離和鑒定了SKPs（皮膚干細(xì)胞），這一研究成果公布在Cell Proliferation 雜志上。
SKPs表達Nestin、Fibronectin、Stat3和Oct4等干細(xì)胞標(biāo)記分子。SKPs能在體外擴增并穩(wěn)定維持其干細(xì)胞特性，并能自發(fā)向神經(jīng)細(xì)胞、平滑肌細(xì)胞和脂肪細(xì)胞分化。本研究在體外利用三步法誘導(dǎo)小鼠干細(xì)胞分化為三維胰島樣集落（IPCs）。在Stage 1中，SKPs以懸浮的細(xì)胞球傳代培養(yǎng)在DMEM/F12培養(yǎng)基（含有20 ng/ml表皮生長因子、40 ng/ml 堿性成纖維細(xì)胞生長因子、1% B27，培養(yǎng)基葡萄糖的濃度為17.3mM）。在Stage 2中，SKPs在DMEM/F12培養(yǎng)基（含有1 mM二丁酰環(huán)腺苷酸、1 μM維甲酸、1% B27 和2% FBS，培養(yǎng)基葡萄糖濃度為5mM）中培養(yǎng)2天，SKPs從細(xì)胞球中遷移出來形成單層細(xì)胞。在Stage 3中，細(xì)胞在DMEM/F12培養(yǎng)基（含有10 mM 煙酰胺、10 nM I型胰島素樣生長因子、2nM 激活素A、1% B27和2% FBS，培養(yǎng)基葡萄糖濃度為17.3mM）的中培養(yǎng)7天，細(xì)胞能夠形成二硫腙陽性（Dithizone positive, DTZ+）的三維胰島樣集落（IPCs）。RT-PCR和間接免疫熒光的結(jié)果表明，IPCs共表達胰島素和C-肽，并表達胰腺β細(xì)胞發(fā)育和功能相關(guān)的基因和轉(zhuǎn)錄因子，如Insulin 1、Insulin 2、Islet-1、Pdx-1、NeuroD/beta2、Glut-2 和 Nkx6.1，但不表達胰腺中其它的激素，如胰高血糖素、生長激素抑制素和淀粉酶。體外葡萄糖刺激的功能性實驗結(jié)果表明，IPCs受葡萄糖濃度刺激而分泌胰島素。
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