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多聚螯合物酶法--EPOS法
發(fā)布時間： 2011-11-22 點擊次數(shù)： 3429次EPOS法（enhanced polymer one-step stainning）
EPOS法（enhanced polymer one-step stainning）是Dako公司近年來推出的一步染色法，它不同于以往的酶標記特異性抗體法，其原理（圖4—13）是采用一種具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）為骨架，將特異性抗體和HRP結合在一起，形成HRP—多聚化合物—特異性抗體巨大復合物，該復合物內不含第二抗體及親和素。染色時，只需在組織切片上加入相應的酶標記特異性抗在組織切片上加入相應的酶標記特異性抗體EPOS試劑，孵育30～60min即可完成。勿需再加酶標記第二抗體。EPOS法操作流程如下。
（1）石蠟切片常規(guī)脫蠟至水，PBS洗3minX3次。
（2）蛋白酶消化或抗原修復（AR），PBS洗3minX3次。
（3）0．3％過氧過氫（Hz02）處理5min。
（4）蒸餾水洗，置于PBS中洗5min。
（5）加入相應的DakoEPOS／HRP試劑，室溫孵育30～60min
（6）PBS洗3minX3次。
（7）0．04％DAB-0．03％Hz02顯色8～12min。
（8）水洗，復染，常規(guī)樹膠封片。
EPOS法只需1次孵育，是目前zui簡便的方法。其特異性較高，基本無背景染色，敏感性雖然不如其他二步多聚螯合物方法，但符合一般工作需要。EPOS法不足之處是現(xiàn)有商品化的酶標記特異性抗體的品種不全，目前只有20余種。此外，試劑價格昂貴，尚不能廣泛推廣應用。
EPOS法（enhanced polymer one-step stainning）
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