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大鼠胰島素細胞傳代的方法
發(fā)布時間： 2021-12-09 點擊次數(shù)： 3146次大鼠胰島素細胞傳代方法：我們在收到細胞后，取出培養(yǎng)瓶在倒置顯微鏡下觀察細胞生長情況。
如果細胞已長滿，即可進行傳代培養(yǎng)。具體步驟如下：
1. 棄去培養(yǎng)液，用PBS（不含鈣，鎂離子）洗1-2次。
2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，倒轉(zhuǎn)放于37度培養(yǎng)箱1-3分鐘預熱，然后又將培養(yǎng)瓶倒轉(zhuǎn)大約30秒后，在倒置顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓分散，輕敲幾下培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，細胞隨即脫落下來。
3. 加入6-8ml*培養(yǎng)基，吸出，分到新的培養(yǎng)瓶中。1:3~1:6傳代；2~3天1次。
如果細胞未長滿，用75%酒精噴灑整個瓶消毒后放到超菌臺內(nèi)，嚴格無菌操作，打開細胞培養(yǎng)瓶，吸出培養(yǎng)液，僅留下10ml培養(yǎng)液在瓶內(nèi)繼續(xù)培養(yǎng)。
細胞來源于美國ScienCell實驗室、美國ATCC細胞庫，所有細胞均為原代細胞，非細胞系。細胞經(jīng)過嚴格的控制（從組織來源、實驗室條件等方面），純度可達98％。不同的細胞傳代次數(shù)不一。多數(shù)細胞種類是從胚胎提取，于原代（或二代）凍存在液氮中。大鼠胰島素細胞采用干冰運輸，客戶收到細胞后，從干冰中取出放入液氮中保存，待實驗安排好后，解凍后即可以進行復蘇培養(yǎng)。美國ATCC細胞庫、ScienCell實驗室的細胞、培養(yǎng)基都是經(jīng)過嚴格檢驗，分離、配制而成，產(chǎn)品質(zhì)量過硬。
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