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在實(shí)驗(yàn)時(shí)怎樣挑選到適合自己試驗(yàn)的抗體呢？
發(fā)布時(shí)間： 2019-10-22 點(diǎn)擊次數(shù)： 2203次一、關(guān)于特異性的選擇：特異性的選擇首要需求考慮四個(gè)方面：蛋白特異性、種屬特異性、實(shí)驗(yàn)方法特異性、符號(hào)物的特異性。
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1、蛋白特異性：針對(duì)需求檢測(cè)的蛋白查找抗體，幾個(gè)細(xì)節(jié)要差異，重組表達(dá)的蛋白和內(nèi)源性蛋白的檢測(cè)，對(duì)抗體的要求是不相同的，留心檢查抗體闡明書的檢測(cè)闡明。假定重組蛋白不是全長(zhǎng)表達(dá)，則需求留心抗體的免疫原區(qū)域是否在重組蛋白區(qū)域內(nèi)。
2、種屬特異性：同種蛋白不同物種，有著或大或小的差異。現(xiàn)在大部分商品化抗體都是以人源蛋白序列為模板重組蛋白或規(guī)劃多肽抗原的，根據(jù)蛋白的同源性的情況與其他種屬發(fā)作穿插反應(yīng)。需求參照闡明書注明的可反應(yīng)種屬信息。一些稀有種屬很難找到抗體，能夠通過(guò)蛋白的序列比對(duì)，選擇同源序列免疫的抗體。
3、實(shí)驗(yàn)方法特異性：現(xiàn)在運(yùn)用抗體的實(shí)驗(yàn)方法有許多，不同的運(yùn)用方法過(guò)程中，由于對(duì)蛋白樣品的處理方法不相同，蛋白的含量有差異，對(duì)抗體的辨認(rèn)表位和效價(jià)要求都是不相同的。具體的根據(jù)闡明書注明的產(chǎn)品應(yīng)用方法進(jìn)行選擇。
4、符號(hào)物的特異性一般根據(jù)實(shí)驗(yàn)操作的實(shí)驗(yàn)方法不會(huì)運(yùn)用帶有符號(hào)的一抗，比方WB、IHC等，都是通過(guò)二抗類的試劑符號(hào)抵達(dá)效果出現(xiàn)的目的。可是根據(jù)儀器剖析的一些實(shí)驗(yàn)，或許就會(huì)運(yùn)用到直接符號(hào)的一抗，比方流式實(shí)驗(yàn)。那么需求了解到自己行將運(yùn)用的儀器能檢測(cè)到的熒光規(guī)模，不通的參數(shù)要求選擇對(duì)應(yīng)的符號(hào)物。在免疫熒光雙標(biāo)實(shí)驗(yàn)中，需求選配不同的熒光物。